Parallellt med att Navalnyj själv satt i förhör genomfördes en husrannsakan riktad mot antikorruptionsstiftelsen FBK som han grundat.
Förundersökningen om misstänkt förtal väcktes förra månaden. Förtalet ska ha skett i sociala medier och riktats mot en veteran från andra världskriget som hyllade Rysslands president Vladimir Putin.
Kremlkritikerna kallar anklagelserna politiskt motiverade. Syftet ska vara att hindra Navalnyj från att resa runt i landet och kampanja mot Putintrogna kandidater i de mer än 30 lokalval som ska äga rum i september.
"Den här eländiga regimen, vi måste bekämpa den", säger Navalnyj i en video han publicerat på Instagram.